BDCA2/CLEC4C：一種新型漿細胞樣樹突狀細胞pDC標記物，干擾素α/β強效抑制劑，阻斷SLE紅斑狼瘡！

1. 什么是漿細胞樣樹突狀細胞（pDC）？

漿細胞樣樹突狀細胞（pDC）是樹突狀細胞（DC）的一種亞類，專門用于分泌I型干擾素（IFN-I）。pDC通過大量分泌IFN-I來激活適應(yīng)性免疫反應(yīng)，并在機體抗病毒免疫中起關(guān)鍵作用。在免疫應(yīng)答中，pDC通過TLR7和TLR9來識別病原體相關(guān)分子，并產(chǎn)生豐富的干擾素α（IFN-α）。IFN-α是一種強有力的抗病毒干擾素，可以抑制病毒的復(fù)制和傳播，并激活其他免疫細胞參與免疫反應(yīng)。pDC被認為是已知分泌IFN-α能力最強的細胞之一 ^[2-4]。

未成熟的pDC在人體的淋巴結(jié)、扁桃腺、外周血、臍帶血以及成人和胎兒的胸腺、胎肝和胎骨髓中都有發(fā)現(xiàn)。pDC異常的活化和過度產(chǎn)生的IFN-α與自身免疫性疾?。ㄈ缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡）、病毒感染（如乙型肝炎病毒HCV、HIV），以及某些白血病和淋巴瘤等腫瘤有關(guān) ^{[2, 5-8]}。然而，這些疾病的發(fā)病機制非常復(fù)雜。根據(jù)現(xiàn)有研究，已鑒定了四種新的人類pDC表面標記物，它們分別是BDCA2、BDCA4、ILT-7和CD123 ^{[2, 5-8]}。

2. 什么是CLEC4C？

CLEC4C（也稱為BDCA-2或CD303）是C型凝集素家族的第4個成員（C-type lectin domain family 4 member C）。CLEC4C是一類含有213個氨基酸的新的二型跨膜糖蛋白，屬于鈣依賴性凝集素家族。CLEC4C主要表達在pDC的表面，該受體的自然配體尚未明確。CLEC4C/BDCA-2的細胞外部分包含C型碳水化合物識別結(jié)構(gòu)域（C-type carbohydrate recognition domain，CRD），該結(jié)構(gòu)域具有與甘露糖、葡萄糖或氨基葡萄糖結(jié)合的C型動物凝集素相似的特征序列。然而，據(jù)報道BDCA-2選擇性地結(jié)合以半乳糖為末端的雙天冠N-鏈接糖。X射線晶體學(xué)和突變研究結(jié)果顯示，甘露糖與保守的Ca2+結(jié)合在主要結(jié)合位點上，該位點具備C型碳水化合物識別結(jié)構(gòu)域的特征 ^[7-9]。

CLEC4C/BDCA-2作為血漿樹突狀細胞的標記物之一。它在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用，特別是在自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）。研究提示，BDCA-2可能通過一種依賴于鈣動員和蛋白酪氨酸的機制，有效地抑制了漿細胞樣樹突狀細胞中干擾素α/β產(chǎn)生的誘導(dǎo)。由于漿細胞樣樹突狀細胞產(chǎn)生干擾素α/β被認為是系統(tǒng)性紅斑狼瘡的主要病理生理因素。因此，CLEC4C/BDCA-2成為阻斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡產(chǎn)生干擾素α/β的潛力靶點 ^[7-9]！

圖1. CLEC4C/BDCA-2和其他含有C型CRD的2型跨膜受體的結(jié)構(gòu) ^[9]

3. CLEC4C在漿細胞樣樹突狀細胞（pDC）免疫反應(yīng)中的負向調(diào)控機制

CLEC4C/BDCA-2作為最新鑒定的pDC表面標記物之一，其胞外部分含有C型碳水化合物識別域，可以與甘露糖、葡萄糖或N-乙酰葡糖胺結(jié)合。雖然BDCA-2的胞內(nèi)部分缺少已知的信號基序，但它與FcR γ鏈有關(guān)，并能通過FcR γ鏈在B細胞抗原受體樣信號體中發(fā)出信號。激活BDCA-2會引發(fā)酪氨酸激酶（Syk）的活化、B細胞連接蛋白（SLP65）的聚集和磷脂酰肌醇特異性磷酯酶（PLCγ2）的活性。這個過程顯示了BDCA-2在pDC中調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和干擾素產(chǎn)生的機制（圖2）^{[3, 10]}。

PLCγ2的激活可能導(dǎo)致Ca²⁺流入并在漿細胞樣樹突狀細胞pDC中起到負調(diào)節(jié)劑的作用。通過BDCA-2的信號傳導(dǎo)途徑減少NFKB（核因子κB）的活化，從而抑制I型干擾素（IFN-Ⅰ）的產(chǎn)生。因此，BDCA-2在pDC中可通過抑制干擾素產(chǎn)生，影響免疫應(yīng)答，對免疫系統(tǒng)的調(diào)控具有重要影響（圖2）^{[3, 10]}。

圖2. CLEC4C/BDCA-2在漿細胞樣樹突狀細胞（pDC）免疫反應(yīng)中的負向調(diào)控機制 ^[10]

4.CLEC4C在系統(tǒng)性紅斑狼瘡SLE和HCV等疾病中的作用

4.1 CLEC4C在系統(tǒng)性紅斑狼瘡SLE中的作用

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一類累及多臟器的自身免疫性疾病，其發(fā)病機制至今未明。如前所述，pDC是免疫系統(tǒng)中重要的抗病毒防御細胞，它們負責(zé)產(chǎn)生大量的干擾素-α（IFN-I）以應(yīng)對感染。然而，在SLE患者中，pDC功能異常和IFN-I的產(chǎn)生過高，引發(fā)免疫反應(yīng)并促進炎癥反應(yīng)，從而加劇SLE的病情。因此，IFN-I被認為是導(dǎo)致SLE發(fā)展的關(guān)鍵因素之一 ^[11]。

目前，許多研究已證實CLEC4C/BDCA-2作為新型漿細胞樣樹突狀細胞主要表達分子，可介導(dǎo)抗原捕獲，是干擾素α/β的強效抑制劑，從而調(diào)節(jié)自身免疫性疾病的發(fā)展，尤其是系統(tǒng)性紅斑狼瘡。例如，24F4A是一種針對BDCA-2的人源化單克隆抗體（mAb）。通過在健康和SLE患者的血液樣本上進行體外實驗，驗證了24F4A與BDCA2結(jié)合并引發(fā)其內(nèi)化，從而抑制pDC通過TLR誘導(dǎo)的IFN-I產(chǎn)生 ^[12-13]。

4.2 CLEC4C在丙型肝炎病毒HCV中的作用

研究發(fā)現(xiàn)，BDCA-2/CLEC4與丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus，HCV）顆?；蚋腥炯毎砻娴姆肿咏Y(jié)構(gòu)相互作用，能夠識別病原體并啟動免疫反應(yīng)。除了HCV，BDCA-2還可以識別其他病毒，如HIV、流感病毒和登革熱病毒等。一旦與病原體結(jié)合，BDCA-2能夠激活pDC，促使其產(chǎn)生大量的IFN-I，從而抑制病毒的復(fù)制和傳播 ^[14]。

研究表明，BDCA-2/CLEC4與HCV E2蛋白相互作用，并影響pDC對HCV感染的免疫反應(yīng)。使用ELISA和RT-PCR檢測了E2對pDC產(chǎn)生IFN-α和其他炎癥因子的影響，并使用Western blot檢測了E2對pDC內(nèi)信號通路的影響。結(jié)果顯示，E2能夠結(jié)合BDCA2，并抑制pDC對HCV感染肝細胞或TLR7激動劑的反應(yīng)，從而降低IFN-α和其他炎癥因子的產(chǎn)生 ^[14]。

4.3 CLEC4C在其它疾病中的作用

目前，雖然國內(nèi)外關(guān)于CLEC4C/BDCA-2的報道和研究有限，但相關(guān)研究表明BDCA-2在多種疾病中可能扮演重要角色，包括慢性炎癥、感染性疾病和自身免疫疾病。這些疾病涉及子宮內(nèi)膜異位癥，鼻炎，哮喘，糖尿病和淋巴結(jié)炎等 [15-17]。此外，BDCA-2還與皰疹病毒EBV，HIV，以及某些真菌感染相關(guān) [10-18]。在血液瘤和實體瘤治療方面，BDCA-2也可能發(fā)揮作用 ^[19-22]。

例如，BDCA-2在腫瘤型漿細胞樣樹突狀細胞中是具有高度特異性的標記物，進一步研究認為抗BDCA-2（CD303）抗體有望作為診斷原始樣漿細胞樹突狀細胞腫瘤（BPDCN）輔助工具，以提高診斷的準確性 ^[21]；CD4+CD56+血液皮膚腫瘤中的BDCA-2表達與腫瘤的特征和生存時間相關(guān)。通過對19例CD4+CD56+血液皮膚腫瘤的研究，發(fā)現(xiàn)其中10例腫瘤表達BDCA-2，而NK細胞系腫瘤中未觀察到表達 ^[22]。

5. CLEC4C的臨床在研藥物

來自Pharmsnap的數(shù)據(jù)表明，目前全球針對CLEC4C/BDCA-2藥物已有4款（Litifilimab；DB-2304；CBS-004；CDX-1402）。其中，渤健生物公司（Biogen, Inc.）開發(fā)的BDCA-2單抗BIIB 059（Litifilimab）是目前進展最迅速的一種藥物。該藥物通過抑制BDCA-2蛋白，減少炎性細胞因子如IFN-I的產(chǎn)生，從而能夠有效治療紅斑狼瘡。BIIB-059是全球唯一一款進入臨床試驗階段的BDCA-2單抗。目前在美國，針對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的治療已經(jīng)進展至臨床III期，而針對慢性皮膚紅斑狼瘡（CLE）的治療則進展至臨床II期。盡管目前的變化并不大，但這一領(lǐng)域的研究仍在不斷進行，我們可以期待未來會有更多創(chuàng)新的CLEC4C/BDCA-2藥物問世。

為鼎力協(xié)助科研和藥企人員針對CLEC4C在系統(tǒng)性紅斑狼瘡等疾病中的臨床應(yīng)用研究，CUSABIO推出CLEC4C活性蛋白（Code: CSB-MP764932HU），助力您在CLEC4C機制方面的研究或其潛在臨床價值的探索。

CLEC4C蛋白

Recombinant Human C-type lectin domain family 4 member C(CLEC4C),partial (Active) （Code: CSB-MP855470HUh7）

High Purity Validated by SDS-PAGE

Purity was greater than 95% as determined by SDS-PAGE.(Tris-Glycine gel) Discontinuous SDS-PAGE (reduced) with 5% enrichment gel and 15% separation gel.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA

Immobilized Human CLEC4C at 2μg/mL can bind Anti-CLEC4C recombinant antibody (CSB-RA855470MA1HU)，the EC₅₀ is 7.658-12.99 ng/mL.