CD22-B細(xì)胞受體輔因子

1. CD22是什么？

CD22，又被稱為Siglec-2，普遍存在于正常B細(xì)胞和B細(xì)胞惡性腫瘤中。CD22主要表達于成熟B細(xì)胞，是具有調(diào)控B細(xì)胞激活作用的細(xì)胞表面粘附分子，有助于B細(xì)胞對抗原反應(yīng)敏感性的控制^[1][2][3]。Tedder TF團隊進一步證明了CD22表達在B細(xì)胞中具有特異性，并且在小鼠和人類中都受到發(fā)育調(diào)控^[4]。如Figure 1所示，CD22可在原B細(xì)胞和前B細(xì)胞中表達，并逐漸轉(zhuǎn)移到細(xì)胞表面，但是表達水平低；在IgM+和IgD+的成熟B細(xì)胞高表達，在濾泡性B細(xì)胞、套細(xì)胞、邊緣區(qū)B細(xì)胞也高表達，但最終在CD27+記憶B細(xì)胞，尤其是漿細(xì)胞中，表達下調(diào)^[5]。此外，最近的研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠腸酸性粒細(xì)胞也觀察到了CD22表達，這是一種新型的表達模式，表明CD22可能具有嗜酸性粒細(xì)胞調(diào)節(jié)功能^[6]。

Figure 1. CD22 protein expression during B-cell development and activation.

2. CD22的結(jié)構(gòu)

如Figure 2所示，人類CD22基因位于19號染色體長臂(19q13.1)，至少有15個外顯子，其中外顯子4-10編碼單鏈Ig域，外顯子11-15編碼跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。

Figure 2. CD22 chromosomal location and organization.

CD22蛋白是I型跨膜蛋白，分子量為140 kDa，是唾液酸結(jié)合的免疫球蛋白樣凝集素家族的重要成員。CD22的胞外域包含七個Ig域（Figure 3），最遠(yuǎn)端的V-set Ig域在結(jié)合α2,6唾液酸(α2,6sia)配體中起主要作用，相連的C2-set Ig域的功能可能是允許V-set Ig域正確折疊^[7][8]。CD22的胞內(nèi)域包括免疫受體酪氨酸抑制基序(ITIM)和免疫受體酪氨酸活化基序(ITAM)^[9]。Ig樣結(jié)構(gòu)域1和2包含配體結(jié)合區(qū)； 當(dāng)六個保守的酪氨酸殘基中的一個或多個被磷酸化時，各種效應(yīng)分子被募集到胞質(zhì)域。CD22α和CD22β是CD22的兩種亞型，其胞外域分別有5個和7個Ig域，這兩種cDNA亞型來源于同一基因的不同拼接。

Figure 3. CD22 structure.

3. CD22的配體與信號通路

3.1 CD22的配體

CD22可以與含唾液酸的細(xì)胞相互作用，包括T細(xì)胞、B細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和紅細(xì)胞^[10][11]。其中能與CD22胞外配體結(jié)合域相互作用的B細(xì)胞表面唾液酸配體為順式配體，其他細(xì)胞表面配體則為反式配體。CD22通過順式作用與B細(xì)胞表面的配體結(jié)合，通過反式作用與其他細(xì)胞表面配體、可溶性糖蛋白或細(xì)胞連接的抗原結(jié)合^[12]。

順式配體是CD22的主要結(jié)合配體，也是CD22活性的重要調(diào)節(jié)劑。CD22作為B細(xì)胞受體(BCR)的一個共受體，通過抗原引起CD22與BCR交聯(lián)，觸發(fā)CD22磷酸化，使下游信號蛋白去磷酸化和失活，從而抑制BCR信號傳導(dǎo)，是抑制BCR的必需因子。CD22的反式作用可能介導(dǎo)細(xì)胞間交聯(lián)、控制B細(xì)胞黏附和遷移，并對T細(xì)胞信號傳導(dǎo)有重要意義。大多數(shù)B細(xì)胞表面的CD22呈遮蔽態(tài)，限制它們與反式配體的作用，除非細(xì)胞經(jīng)過唾液酸酶或高碘酸鹽預(yù)處理，才能結(jié)合外源性唾液酸。非遮蔽態(tài)CD22可能促進其與反式配體或順式配體的特殊亞基(可能包括BCR)作用。

3.2 BCR調(diào)節(jié)機制及下游信號通路

CD22對B細(xì)胞信號傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)能力由CD22與BCR的遠(yuǎn)近決定，同時也受細(xì)胞外相互作用的控制。CD22是BCR的一個共受體，通過抗原或抗Ig引起CD22與BCR交聯(lián)。CD22與BCR交聯(lián)后會集中到脂筏上，然后Lyn會磷酸化CD22的酪氨酸殘基^[13][14]。磷酸化后，這些酪氨酸殘基會變成下游信號分子SH2結(jié)構(gòu)域的結(jié)合位點，這些分子會進一步激活其他信號傳導(dǎo)分子（Figure 4）。例如Src同源性磷酸酶1（SHP-1）蛋白，主要作用是去磷酸化BCR，從而下調(diào)BCR信號并調(diào)節(jié)Ca²⁺信號轉(zhuǎn)導(dǎo)^[15]。

SHP-1的作用對象包括CD19和SLP65/B細(xì)胞接頭蛋白（BLNK）^[16]。其中SLP65/BLNK可形成一個支架并關(guān)聯(lián)多個信號分子，包括Vav-1、Bruton酪氨酸激酶（Btk）和磷脂酶Cγ2（PLCγ2）。PLCγ2將磷脂酰肌醇4,5-雙磷酸酯（PtdIns（4,5）P2）轉(zhuǎn)化為1,4,5-三磷酸肌醇（Ins（1,4,5）P3）和二?；视停―AG）。Ins（1,4,5）P3可通過多種途徑促進Ca²⁺從細(xì)胞內(nèi)存儲的釋放，包括Ca²⁺釋放激活通道（CRAC）活化、核因子κB（NF-κB）激活，T細(xì)胞和因子（NFAT）活化及胞外信號調(diào)節(jié)激酶信號通路。

Figure 4. Intracellular signaling pathways of CD22

4. CD22與疾病

在第三部分中已經(jīng)提到，CD22 分子對BCR復(fù)合物識別抗原產(chǎn)生的信號起抑制作用^[16]。該抑制作用在CD22缺陷小鼠的研究實驗中得到了進一步驗證^[17]。CD22缺陷小鼠的B細(xì)胞均表現(xiàn)出輕微活化狀態(tài)，^high IgD、^low IgM的成熟B細(xì)胞比例增高，B細(xì)胞表面IgM (sIgM)水平降低，IgM的分泌增加，MHC II類分子表達量增加，B細(xì)胞激活的閾值下調(diào)^[18]。作為限制B細(xì)胞的抗原，CD22為治療自身免疫疾病和血液癌癥中的B細(xì)胞失調(diào)提供了有效靶點。

4.1 CD22與自身免疫性疾病

CD22通過與BCR交聯(lián)，抑制B細(xì)胞對自身抗原的反應(yīng)，阻止自身反應(yīng)性B細(xì)胞激活，從而抑制自身免疫性疾病的發(fā)生。CD22表達或功能受損在自身免疫性疾病的發(fā)病機制中起作用，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)等^[19][20]。

SLE是一種常見的累及多臟器的慢性系統(tǒng)性自身免疫性疾病，其主要特征是多克隆B細(xì)胞異?；罨⒆陨砜贵w產(chǎn)生、免疫復(fù)合物沉積，引起多臟器損傷。CD22缺陷小鼠的B細(xì)胞對受體信號的反應(yīng)過度，BCR結(jié)合引起的Ca²⁺內(nèi)流增加，使血清IgG抗dsDNA抗體滴度增加，這些抗體是多克隆起源的，存在不良變異和高親和力。

4.2 CD22與血液癌癥

在第一部分中，我們已經(jīng)提到，CD22僅在成熟B細(xì)胞中表達。在大多數(shù)情況下，正常B細(xì)胞向腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程中CD22 分子依然表達。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，約60-80%的B細(xì)胞系淋巴瘤及白血病細(xì)胞表達CD22分子。目前除了化學(xué)療法、放射療法和裸mAb療法之外，放射免疫療法正在成為非霍奇金淋巴瘤患者的第四種治療方法。放射性標(biāo)記的CD22 mAb在B細(xì)胞淋巴瘤診斷和分期中敏感度很高。131I或90Y標(biāo)記的CD22 mAb（LL2，埃普拉單抗）與CD22細(xì)胞外第三個Ig結(jié)構(gòu)域結(jié)合可以完全緩解由裸CD22 mAb（LL2）在體外介導(dǎo)的抗體和補體依賴性細(xì)胞毒性^[21][22]。

5. CD22相關(guān)藥物研究進展

CD22分子是B細(xì)胞表面抑制性輔助受體之一，它與B細(xì)胞的發(fā)展、分化和功能有著密切的關(guān)系。CD22限制性地表達于成熟B細(xì)胞和大多數(shù)B淋巴瘤細(xì)胞表面。以CD22為靶點，進行腫瘤免疫治療已經(jīng)成為免疫研究熱點之一。目前，關(guān)于CD22分子的免疫靶向治療，除了治療性抗體外，還有CAR-T細(xì)胞療法。截止到2019年11月，雖然CD22相關(guān)抗體藥物已批準(zhǔn)上市的只有兩種，但關(guān)于CD22 CAR-T細(xì)胞治療和抗體藥物的臨床研究有近108項。FDA已批準(zhǔn)上市的CD22相關(guān)藥物如下表所示：

在研藥物：

在研CAR-T細(xì)胞治療詳情請點擊這里：https://clinicaltrials.gov/ct2/results?cond=&term=CD22&cntry=&state=&city=&dist=.