Nectin-4：免疫球蛋白IgSF家族新靶點(diǎn)，推動(dòng)多種腫瘤靶向藥物臨床轉(zhuǎn)化！

1. 什么是Nectin-4？

1.1 Nectin-4的結(jié)構(gòu)

Nectin cell adhesion molecule 4（Nectin-4）是一種免疫球蛋白樣分子，屬于Nectin成員（還包括NECTIN-1、NECTIN-2和NECTIN-3）。此外，Nectin-4與脊髓灰質(zhì)炎病毒受體（PVR/CD155）同源，也被稱作脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白PVRL4。Nectin-4作為免疫球蛋白超家族（IgSF）的一員，其分子量約為55.5 kDa，510個(gè)氨基酸構(gòu)建而成，展示出特有的三結(jié)構(gòu)域架構(gòu)：蛋白的N端攜帶信號(hào)肽，引導(dǎo)其合成與定位；三個(gè)免疫球蛋白樣胞外結(jié)構(gòu)域，這些結(jié)構(gòu)域促進(jìn)細(xì)胞表面的相互識(shí)別與粘連；一個(gè)跨膜區(qū)，將胞外結(jié)構(gòu)與胞內(nèi)環(huán)境連接；以及C端含afadin結(jié)合基序的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，使Nectin-4能與afadin蛋白特異結(jié)合，促進(jìn)細(xì)胞間的粘附，影響細(xì)胞骨架組織及信號(hào)傳導(dǎo)（圖1） ^[1-2]。

圖1. Nectin-4的結(jié)構(gòu) ^[1]

1.2 Nectin-4的表達(dá)和功能

Nectin-4在細(xì)胞與細(xì)胞之間的粘附中扮演著關(guān)鍵角色。Nectin-4的三個(gè)免疫球蛋白（Ig）樣結(jié)構(gòu)域使其在多種生理過(guò)程中發(fā)揮作用，包括細(xì)胞粘附、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞骨架的組織。與其它Nectins不同的是，Nectin-4在胚胎和胎盤組織中特異性地豐富表達(dá)，而在成年組織中的表達(dá)則顯著下降。一項(xiàng)研究揭示Nectin4可能是TIGIT的新型配體，并證明針對(duì)Nectin4的特異性抗體可增強(qiáng)體外和體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的殺傷。Nectin4還被鑒定為麻疹病毒屬成員的上皮受體，可能用于特異性靶向、感染和破壞表達(dá)Nectin-4/PVRL4的腫瘤。此外，越來(lái)越多的研究提示，NECTIN-4/Nectin-4的異常表達(dá)和活性可能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移，成為抗腫瘤治療的潛力靶標(biāo) ^[3-4]。

2. Nectin-4相關(guān)的信號(hào)機(jī)制

2.1 Nectin-4相關(guān)的細(xì)胞分子機(jī)制

Nectin-4是一種在腫瘤發(fā)展中扮演重要角色的蛋白質(zhì)，它通過(guò)調(diào)控PI3K/AKT信號(hào)通路參與多種腫瘤進(jìn)程。在缺氧環(huán)境下，Nectin-4的細(xì)胞外部分脫落成為可溶性形式，與內(nèi)皮細(xì)胞上的整合素β4結(jié)合，激活Src、PI3K、Akt和eNOS等分子，促進(jìn)血管生成，此過(guò)程涉及NO的生成。例如，在乳腺癌中，Nectin-4與ERBB2協(xié)同作用，激活PI3K/AKT通路，促進(jìn)DNA合成；同時(shí)，可溶性Nectin-4能通過(guò)PI3K/AKT軸激活Wnt/β-catenin信號(hào)，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移；Nectin-4還能激活PI3K/AKT/NF-κB通路，推動(dòng)骨肉瘤發(fā)展；并通過(guò)激活Rac1，促進(jìn)胃癌和膽囊癌的進(jìn)展（圖2） ^[5]。

Nectin-4不僅作用于PI3K/AKT通路，還影響其他信號(hào)途徑。它與催乳素受體通過(guò)JAK2-STAT5a通路相互作用，對(duì)前列腺癌的生長(zhǎng)有重要作用。Nectin-4還能加強(qiáng)p95-ErbB2引發(fā)的JAK-STAT3信號(hào)，并與之共同調(diào)控SOX2基因，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖。此外，Nectin-4通過(guò)調(diào)控CXCR4/CXCL12-LYVE-1軸，促進(jìn)腫瘤相關(guān)的淋巴管生成和淋巴轉(zhuǎn)移。一項(xiàng)研究還表明Nectin-4可以調(diào)節(jié)細(xì)胞間粘附、重塑肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架、觸發(fā)上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化EMT，并最終導(dǎo)致遠(yuǎn)處器官的腫瘤發(fā)展。這些發(fā)現(xiàn)揭示了Nectin-4在腫瘤細(xì)胞生物學(xué)中的廣泛作用，為癌癥治療提供了潛在的新靶點(diǎn)和策略 ^[6-8]。

圖2. Nectin-4通過(guò)調(diào)控PI3K/AKT信號(hào)通路參與多種腫瘤進(jìn)程 ^[5]

2.2 Nectin-4相關(guān)的藥物研究機(jī)制

首個(gè)針對(duì)Nectin-4的ADC藥物（恩諾單抗，Enfortumab Vedotin-ejfv，以下簡(jiǎn)稱EV）已獲批用于治療尿路上皮癌。研究表明，EV是由蛋白酶依賴性的連接子綁定微管相關(guān)抑制劑（MMAE）與抗Nectin-4單克隆抗體（AGS-22M6）成的復(fù)合物。當(dāng)EV與癌細(xì)胞表面的Nectin-4蛋白結(jié)合時(shí)，觸發(fā)內(nèi)吞作用，使得EV和Nectin-4形成的復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。進(jìn)入細(xì)胞后，不同的酶對(duì)EV復(fù)合物進(jìn)行部分水解。最終，EV被運(yùn)送到溶酶體，在溶酶體內(nèi)的酸性環(huán)境下被完全分解，從而釋放MMAE。MMAE阻止微管聚合，進(jìn)而分裂受到抑制，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。在臨床前研究中，EV顯著抑制了人膀胱癌、乳腺癌、肺癌和胰腺癌小鼠異種移植模型中的腫瘤生長(zhǎng)。這些研究結(jié)果，進(jìn)一步推動(dòng)了靶向Nectin-4的藥物在臨床研究中的轉(zhuǎn)化（圖3） ^[5]。

圖3. 靶向Nectin-4的藥物抑制腫瘤細(xì)胞的過(guò)程 ^[5]

3. Nectin-4和疾病相關(guān)的研究

近年來(lái)Nectin-4因其在多種癌癥類型中異常過(guò)表達(dá)而受到關(guān)注，包括甲狀腺癌、食管癌、胃癌、膽囊癌、乳腺癌、皮膚癌、結(jié)直腸癌等，并與惡性腫瘤的診斷、治療、預(yù)后等顯著相關(guān)。正如前面提到的，靶向Nectin-4的ADC已被FDA批準(zhǔn)用于治療局部晚期或轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌。鑒于其在癌癥中的作用，Nectin-4不僅成為診斷和預(yù)后的生物標(biāo)志物，也成為極具前景的腫瘤研究靶點(diǎn) ^[9]！

在消化系統(tǒng)癌癥中，以結(jié)直腸癌為例，Nectin-4不僅作為關(guān)鍵的生物標(biāo)志物，還通過(guò)與整合素β1的相互作用，促進(jìn)血管生成，對(duì)患者預(yù)后產(chǎn)生負(fù)面影響，并與對(duì)5-氟尿嘧啶（5-FU）的耐藥性相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)基因沉默技術(shù)下調(diào)Nectin-4的表達(dá)，展示出治療結(jié)直腸癌的可能性 ^[10]。在食道癌中，Nectin-4的高表達(dá)與較短的患者生存期相關(guān)，同時(shí)在細(xì)胞層面增強(qiáng)了食道癌細(xì)胞的活力和遷移能力 ^[11]。對(duì)于胃癌，Nectin-4的表達(dá)水平與不同的TNM分期緊密相關(guān) ^[12]。而在膽囊癌中，Nectin-4通過(guò)同一信號(hào)通路介導(dǎo)Rac1的激活，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)、增殖和轉(zhuǎn)移 ^[13]。

在生殖系統(tǒng)癌癥中，Nectin-4同樣扮演著重要角色。宮頸癌中，Nectin-4可能參與轉(zhuǎn)移性腫瘤的5-FU耐藥機(jī)制，其特定結(jié)構(gòu)域影響血管生成和DNA修復(fù)過(guò)程 ^[14]。在卵巢癌中，Nectin-4的高表達(dá)與疾病的發(fā)生、發(fā)展及球狀體形成密切相關(guān)，進(jìn)而影響化療的效果 ^[15]。在呼吸系統(tǒng)腫瘤，如肺癌中，Nectin-4濃度的升高與生存期縮短、腫瘤侵襲性和易轉(zhuǎn)移性增加相關(guān)，表明其在肺癌早期診斷中的潛在價(jià)值 ^[16]。

泌尿系統(tǒng)腫瘤，尤其是尿路上皮癌，Nectin-4的高表達(dá)與不良預(yù)后因素如較高的癌癥死亡率、淋巴血管浸潤(rùn)和高級(jí)別腫瘤緊密相關(guān) ^[17]。Nectin-4還與多種其他癌癥類型有直接聯(lián)系，比如乳腺癌 ^[18]、肝癌 ^[19]、頭頸部癌 ^[20]、甲狀腺癌 ^[20]、黑色素瘤 ^[22]和皮膚鱗狀細(xì)胞癌 ^[23]。它在乳腺癌中可作為血清標(biāo)記物，在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中作為生物標(biāo)志物，以及在黑色素瘤中與AKT/PI3K信號(hào)通路的調(diào)控密切相關(guān)，這些發(fā)現(xiàn)共同強(qiáng)調(diào)了Nectin-4在癌癥研究和治療策略制定中的核心地位。