標(biāo)簽抗體概述

1. 親和標(biāo)簽

這些標(biāo)簽使您能夠從粗細(xì)胞裂解液中純化蛋白質(zhì)，即使您沒有關(guān)于其生化性質(zhì)的任何先前知識。使用特定的親和樹脂可以純化親和標(biāo)記的蛋白質(zhì)，而商業(yè)上可購買的抗體可以方便地用于檢測。以下是一些常用的親和標(biāo)簽：

1.1 His標(biāo)簽

這個標(biāo)簽是一個短肽，由六個組氨酸殘基（His-His-His-His-His-His）組成。它專門設(shè)計用于親和純化重組蛋白質(zhì)。His標(biāo)簽的相對較小的尺寸使其非常容易整合到表達(dá)載體中。此外，由于這些標(biāo)簽不會形成與底物結(jié)合的二級結(jié)構(gòu)，即使在變性條件下，您也可以輕松純化感興趣的蛋白質(zhì)。

由于這些特性，His融合標(biāo)簽相比其他標(biāo)簽具有許多優(yōu)勢，是目前用于純化的最常用的融合標(biāo)簽。可以使用His標(biāo)簽抗體進(jìn)行His標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的檢測和表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位和純化，以及His融合表達(dá)蛋白的定性或定量檢測等。

CUSABIO的His標(biāo)簽抗體：

6*His 單克隆抗體 (CSB-MA000011M0m)

應(yīng)用: ELISA, WB

1.2 谷胱甘肽- s轉(zhuǎn)移酶(GST)標(biāo)簽

GST可用于通過將其編碼序列插入感興趣的蛋白質(zhì)旁邊來純化蛋白質(zhì)。經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯后，它們將以融合蛋白的形式表達(dá)。GST標(biāo)簽系統(tǒng)具有蛋白表達(dá)量高、表達(dá)產(chǎn)物純化方便、有利于制備GST抗體等特點。GST融合蛋白可溶于水溶液，可從細(xì)菌裂解液中提取，并在不變條件下通過親和層析獲得。融合蛋白又是一種非常好的強免疫原，因此很容易制備針對新蛋白的抗體。

但是GST標(biāo)簽的一個缺點是它是一個30kDa的蛋白質(zhì)，它的相對較大的尺寸使純化變得困難。此外，它還增加了扭曲蛋白質(zhì)自然構(gòu)象的風(fēng)險，使它們不適合進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究。為了防止這些事情的發(fā)生，可以考慮在純化后使用特定的蛋白酶從重組蛋白中切割GST基團。近年來，在原核表達(dá)系統(tǒng)中，谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶GST表達(dá)純化系統(tǒng)的應(yīng)用較為普遍。

CUSABIO GST標(biāo)簽抗體：

GST單克隆抗體 (CSB- MA000031M0m)

應(yīng)用: ELISA, WB

1.3 麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標(biāo)簽

MBP是大腸桿菌中天然存在的一種約42 kDa的蛋白質(zhì)，由malE基因編碼，負(fù)責(zé)麥芽糊精(一種碳水化合物)的攝取、分解和運輸。最初作為蛋白質(zhì)表達(dá)標(biāo)簽在20世紀(jì)80年代末被開發(fā)，它是最知名和最成熟的標(biāo)記在微生物中表達(dá)的蛋白質(zhì)的手段之一。此外，已知它能顯著提高多種下游融合的靶蛋白的溶解度。

然而，MBP標(biāo)簽提高蛋白質(zhì)溶解度的確切機制尚不清楚，通常認(rèn)為它是在蛋白質(zhì)合成期間和之后穩(wěn)定和保護其下游乘客蛋白免受蛋白水解降解。mbp融合蛋白的細(xì)胞質(zhì)產(chǎn)量通常也較高，因為融合蛋白為高效翻譯起始提供了可靠的環(huán)境。

CUSABIO MBP 標(biāo)簽抗體：

MBP單克隆抗體 (CSB-MA000061M0m)

應(yīng)用: ELISA, WB

1.4 鈣調(diào)蛋白結(jié)合蛋白(CBP)標(biāo)簽

CBP親和標(biāo)簽是一種有用的蛋白質(zhì)研究標(biāo)簽，可通過DNA重組技術(shù)將其添加到目標(biāo)蛋白質(zhì)的N或C端。該標(biāo)簽來源于骨骼肌肌球蛋白輕鏈激酶。該標(biāo)簽由26個氨基酸殘基組成，分子量為4 kDa，序列為KRRWKKNFIAVSAANRFKKISSSGAL。CBP相對較小的大小(4 kDa)使其非常適合在溫和的條件下快速敏感的捕捉標(biāo)簽融合蛋白。CBP標(biāo)簽對鈣調(diào)蛋白(CaM)具有較高的親和力。C標(biāo)簽與鈣調(diào)蛋白樹脂結(jié)合，蛋白質(zhì)可以用含有低濃度鈣螯合劑EGTA的中性緩沖液洗脫。CBP Tag抗體是分析CBP標(biāo)記蛋白的有用工具。

CUSABIO CBP 標(biāo)簽抗體：

CBP標(biāo)簽單克隆抗體(CSB-MA000285)

應(yīng)用: ELISA, WB

2. 表位標(biāo)簽

這些標(biāo)簽通常比親和標(biāo)簽更小，并且能夠被抗體迅速識別。由于它們相對較小的尺寸，它們對融合蛋白的結(jié)構(gòu)幾乎沒有或沒有影響。表位標(biāo)簽非常適合多種下游應(yīng)用，包括免疫印跡（WB）、共免疫沉淀（Co-IP）和免疫熒光實驗。以下是一些最受歡迎的表位標(biāo)簽：

2.1 Flag標(biāo)簽

Flag標(biāo)簽是一種常用的短肽標(biāo)簽（DYKDDDDK），可以融合到蛋白的C-端或N-端。該系統(tǒng)用于重組DNA技術(shù)，可用于親和色譜和分離具有多個亞基的蛋白質(zhì)復(fù)合物，也可以與其他親和標(biāo)簽一起使用。

由于Flag標(biāo)簽與其它同類標(biāo)簽相比更親水性，因此它們不會使附著的蛋白質(zhì)變性或失活。因此，現(xiàn)在廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型，包括細(xì)菌、酵母和哺乳動物細(xì)胞等。相應(yīng)的Flag標(biāo)簽抗體也被廣泛使用。Flag標(biāo)簽可以通過添加腸激酶來去除，腸激酶特異性識別肽序列C-端的5個氨基酸殘基。Flag抗體可用于檢測和表達(dá)Flag標(biāo)記的融合蛋白的表達(dá)情況、細(xì)胞內(nèi)定位以及純化和定性或定量檢測Flag融合表達(dá)的蛋白。

CUSABIO 標(biāo)志標(biāo)簽抗體顯示：

標(biāo)記單克隆抗體 (CSB-MA000156)

應(yīng)用: ELISA, WB, IF, IP

2.2 Myc標(biāo)簽

與Flag標(biāo)簽類似，Myc標(biāo)簽是一種常用的短肽標(biāo)簽（EQKLISEEDL），源自c-myc基因產(chǎn)物，并被許多商業(yè)抗體所識別。該標(biāo)簽可以通過重組DNA技術(shù)添加到C端或N端，并可用于親和色譜和分離具有多個亞基的蛋白質(zhì)復(fù)合物。此外，它還可以用于檢測細(xì)菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞中重組蛋白的表達(dá)。

這個經(jīng)過充分驗證的Myc標(biāo)簽為檢測和純化帶標(biāo)簽?zāi)繕?biāo)蛋白提供了可靠的方法，無需特定的抗體或探針。它已成功應(yīng)用于WB雜交技術(shù)、免疫沉淀（IP）和流式細(xì)胞術(shù)。Myc重組蛋白可以通過將Myc標(biāo)記的抗體與二乙烯基硫酸酯活化的瓊脂糖耦合來親和純化，但是Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會降低蛋白的活性，因此Myc標(biāo)簽系統(tǒng)在檢測中被廣泛應(yīng)用，但很少用于純化。

CUSABIO Myc標(biāo)簽抗體顯示：

Myc標(biāo)簽單克隆抗體 (CSB-MA000041M0m)

應(yīng)用: ELISA, WB, IF, IP

2.3 人類流感血凝素（HA）標(biāo)簽

HA（血凝素）標(biāo)簽是源自人類流感病毒HA蛋白的表面糖蛋白的肽序列（YPYDVPDYA）。HA標(biāo)簽系統(tǒng)使用HA短肽與目標(biāo)蛋白融合，可以位于蛋白質(zhì)的C端或N端。該系統(tǒng)促進(jìn)了流感病毒感染宿主的能力，并被許多商業(yè)抗體所識別。它已在多種細(xì)胞類型中廣泛應(yīng)用，并且相應(yīng)的HA標(biāo)記抗體也被廣泛使用。HA標(biāo)記的抗體可以特異性識別帶有HA標(biāo)簽的融合蛋白，無論其位于C端還是N端。

CUSABIO的HA標(biāo)簽抗體展示：

HA標(biāo)記單克隆抗體 (CSB-MA000158)

應(yīng)用: ELISA, WB, IF, IP

3. 熒光標(biāo)簽 - GFP標(biāo)簽

熒光標(biāo)簽，也稱為熒光標(biāo)記，是一種化學(xué)上附加的分子，用于檢測生物分子，如蛋白質(zhì)、抗體或氨基酸。通常，熒光標(biāo)記或標(biāo)簽使用熒光分子的反應(yīng)性衍生物，也稱為熒光染料。廣泛采用各種標(biāo)記技術(shù)，如酶標(biāo)記、蛋白標(biāo)記和遺傳標(biāo)記。乙溴化乙錠、熒光素和綠色熒光蛋白（GFP）是常見的標(biāo)簽。其中，綠色熒光蛋白（GFP）是該類別中最常用的蛋白質(zhì)標(biāo)簽之一，因為它具有非毒性?；谶@一特性，該標(biāo)簽可用于檢測活細(xì)胞和固定細(xì)胞中的標(biāo)記蛋白。

綠色熒光蛋白，以下簡稱GFP，最早于1962年從水母Aequorea victoria中分離出來。該蛋白表現(xiàn)出明亮的綠色熒光，在暴露于藍(lán)光或紫外（UV）光下不易褪色。它可以位于蛋白質(zhì)的C端或N端，并已廣泛應(yīng)用于細(xì)菌、酵母和哺乳動物細(xì)胞等各種類型的細(xì)胞中。相應(yīng)的GFP標(biāo)記抗體也被廣泛使用。

GFP及其突變體EGFP等廣泛用于檢測基因表達(dá)效率，以及與感興趣的蛋白質(zhì)融合表達(dá)，用于檢測感興趣蛋白質(zhì)的表達(dá)和分布。通常，GFP抗體不僅可以檢測GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w，還可以檢測GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w融合蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位和純化，以及定性或定量檢測GFP融合表達(dá)蛋白等。

CUSABIO的GFP標(biāo)簽抗體：

GFP單克隆抗體 (CSB-MA000051M0m)

應(yīng)用: ELISA, WB, IP

4. 其他標(biāo)簽

除了上述的蛋白質(zhì)標(biāo)簽外，CUSABIO還提供了幾種不常見的標(biāo)簽抗體，用于特殊的蛋白質(zhì)標(biāo)簽，包括Sumo標(biāo)簽、Trx標(biāo)簽、S標(biāo)簽、E2標(biāo)簽、HSV標(biāo)簽等。

CUSABIO的不常見標(biāo)簽抗體：

相撲標(biāo)簽單克隆抗體 (CSB-MA000132M0m)

應(yīng)用: ELISA, WB

S-Tag Monoclonal Antibody (CSB-MA000172)

應(yīng)用: ELISA, WB