CCR4：Treg細(xì)胞上的關(guān)鍵趨化因子受體，有望成為新型腫瘤免疫治療靶點(diǎn)!

什么是CCR4？

C-C趨化因子受體（C-C chemokine receptor type 4，CCR4），也稱為CD194，由包含7次跨膜結(jié)構(gòu)域的多肽鏈組成，屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族。其含360個氨基酸，分子量約為41kD，主要表達(dá)于各種淋巴細(xì)胞和組織，其配體包括多種趨化因子 ^[2]。作為重要的趨化因子受體，CCR4與其它趨化因子配體產(chǎn)生結(jié)合，行使其功能，參與調(diào)控人類自身免疫疾病過程，主要包括特應(yīng)性皮炎、哮喘、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤 ^[3]。過去，研究人員對趨化因子的認(rèn)識限于在炎癥反應(yīng)中的趨化作用，然而越來越多的研究顯示，趨化因子結(jié)合其受體在腫瘤細(xì)胞的浸潤性生長，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等行為中發(fā)揮重要作用。CCR4作為腫瘤轉(zhuǎn)移中關(guān)鍵的趨化因子受體，多項研究已證實(shí)，CCR4高表達(dá)與血液系統(tǒng)腫瘤以及惡性實(shí)體瘤的浸潤和預(yù)后密切相關(guān)，靶向CCR4有望成為惡性腫瘤免疫治療的新策略。

CCR4的配體有哪些？

CCR4已知的配體有CCL17、CCL22、RANTES、MCP-1、MIP-1α和最新配體CKLF1，但也可能存在更多的趨化因子配體 ^{[1-3, 5]}。目前的研究集中在CCR4和高親和力配體CCL17以及CCL22之間的互相作用。CCL17又稱胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子（TARC），主要在胸腺中表達(dá)，也表達(dá)于其他組織如肺、結(jié)腸、小腸等。該趨化因子與CCR4特異性結(jié)合，誘導(dǎo)T細(xì)胞的趨化作用。CCL22又稱巨噬細(xì)胞源趨化因子（MDC），主要由樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌產(chǎn)生，通過與細(xì)胞表面受體CCR4結(jié)合，對T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞的分化、發(fā)育、增殖起重要的調(diào)控作用。近年來，CCL17和CCL22作為CCR4的高親和力受體，兩者同CCR4結(jié)合不僅在多種炎癥性疾病中發(fā)揮重要作用，而且與多種惡性腫瘤的生物學(xué)行為和轉(zhuǎn)移機(jī)制密切相關(guān) ^[6]。

CCR4介導(dǎo)的信號通路機(jī)制

CCL17和CCL22作為CCR4最常見的特異性配體，越來越多的研究表明了它們在免疫應(yīng)答中的作用，尤其在腫瘤細(xì)胞中的作用。但是，趨化因子及其受體在腫瘤的形成和發(fā)展中產(chǎn)生的作用是復(fù)雜而精細(xì)的，它們是如何激活某些信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的機(jī)制尚未研究清楚。

目前的研究認(rèn)為，CCR4結(jié)合CCL17/CCL22可誘導(dǎo)Treg細(xì)胞在腫瘤細(xì)胞周圍的微環(huán)境里富集。Treg細(xì)胞是T細(xì)胞的一種，對免疫反應(yīng)可產(chǎn)生抑制的作用。這種抑制作用能夠有效地避免自體免疫反應(yīng)的發(fā)生。腫瘤細(xì)胞正是利用這些Treg細(xì)胞來擺脫免疫系統(tǒng)的威脅（點(diǎn)擊了解更多Treg細(xì)胞）。如圖1，CCR4通過CCR4+Treg細(xì)胞發(fā)揮免疫效應(yīng)，參與到不同腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移，淋巴細(xì)胞生成以及淋巴細(xì)胞的呈遞作用，腫瘤炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生等等 ^[7]，其原因是Treg細(xì)胞表面的CCR4通過與其趨化因子配體結(jié)合，從而趨化Treg細(xì)胞，引起腫瘤免疫逃逸，其機(jī)制作用類似Treg細(xì)胞特異性靶點(diǎn)CCR8（點(diǎn)擊查看CCR8相關(guān)文章）。

圖1. CCR4結(jié)合CCL17/CCL22誘導(dǎo)Treg細(xì)胞腫瘤免疫抑制

CCR4在癌癥等疾病中的作用

CCR4作為一個逐漸被認(rèn)識的趨化因子受體，越來越多的研究表明，CCR4與趨化因子CCL17/CCL22結(jié)合，參與到體內(nèi)許多重要的生理和病理效應(yīng)，并與過敏性炎癥疾?。ㄌ貞?yīng)性皮炎）、自身免疫性疾?。愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎）以及多種腫瘤（T細(xì)胞淋巴瘤、乳腺癌、肺癌和胃癌等等）相關(guān) ^[8]。

CCR4和過敏性炎癥疾病

近期，一款CCR4抑制劑RPT193在治療特應(yīng)性皮炎（Allergic Dermatitis，AD）中取得突破，其臨床研究表明，RPT193具有良好的耐受性和安全性，對重度特應(yīng)性皮炎患者的療效顯著。相關(guān)研究進(jìn)一步揭示，RPT193治療優(yōu)于IL-4R抗體治療。RPT193可通過阻斷Th2細(xì)胞上高表達(dá)的CCR4受體，選擇性抑制Th2細(xì)胞向炎癥組織的遷移，在特應(yīng)性皮炎和哮喘疾病中發(fā)揮作用 ^[9]。明確的療效信號預(yù)示著RPT193巨大臨床潛力，同時也說明CCR4靶點(diǎn)在過敏性炎癥疾病中的巨大研究前景。

CCR4和自身免疫性疾病

有數(shù)據(jù)表明，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis, RA）和系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）患者外周血中，Treg細(xì)胞上趨化因子受體CCR4表達(dá)明顯增加，且CCR4表達(dá)異常與疾病的進(jìn)展有相關(guān)性。其原因可能是CCR4受體反應(yīng)性增多，Tregs細(xì)胞獲得定向遷移至致病關(guān)節(jié)的能力，從而促進(jìn)其向炎癥部位移動，發(fā)揮免疫抑制作用 ^[10]。因此，進(jìn)一步的探索RA和SLE患者的Treg細(xì)胞變化與趨化因子受體CCR4表達(dá)關(guān)系，將對患者的發(fā)病機(jī)制具有臨床指導(dǎo)意義。

CCR4和腫瘤疾病

最早對于CCR4和惡性腫瘤關(guān)系的研究主要是針對成人Ｔ細(xì)胞性白血病／淋巴瘤等血液系統(tǒng)腫瘤的研究 ^[11]。目前已有的研究證實(shí)，CCR4表達(dá)還與乳腺癌 ^[12]、肺癌 ^[13]、胃癌 ^[14]、胰腺癌 ^[15]、肝癌 ^[16]、結(jié)腸直腸癌 ^[17]等多種惡性腫瘤相關(guān)。

在血液瘤以及其它惡性腫瘤中，CCR4主要是通過同配體CCL17和CCL22的結(jié)合趨化Treg細(xì)胞聚集引起免疫逃逸，導(dǎo)致不良臨床后果。比如，在Ｔ細(xì)胞性白血病患者中，由腫瘤細(xì)胞分泌的CCL17和CCL22創(chuàng)造了腫瘤免疫逃逸的微環(huán)境，趨化了CCR4+Treg細(xì)胞的聚集 ^[11]。類似的，在乳腺癌中，CCR4/CCL22誘導(dǎo)Treg細(xì)胞遷移到腫瘤周圍的淋巴浸潤組織中，促進(jìn)Treg細(xì)胞表達(dá)，促進(jìn)腫瘤生長 ^[12]。Treg細(xì)胞數(shù)量的異常升高往往與腫瘤患者較差的預(yù)后密切相關(guān)。而CCR4表達(dá)于Treg細(xì)胞，通過同配體CCL17和CCL22的結(jié)合，可以特異性的趨化Treg細(xì)胞的聚集和浸潤，影響腫瘤生物學(xué)行為。因此，CCR4作為Treg細(xì)胞的表面標(biāo)志，通過與其配體的結(jié)合，在腫瘤免疫逃逸機(jī)制尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮重要作用。深入開展CCR4-CCL17/CCL22生物軸的研究有望為惡性腫瘤的靶向治療開辟新的途徑。

靶向CCR4的臨床應(yīng)用前景

CCR4是Treg上占據(jù)支配地位的趨化因子受體。CCR4的生物標(biāo)志與治療潛力正在為腫瘤等疾病的臨床研究提供新的方向。值得一提的是，早在2018年，RAPT Therapeutics公司的首款靶向CCR4單克隆抗體藥物Mogamulizumab獲FDA批準(zhǔn)上市，用于治療罕見皮膚病-皮膚T細(xì)胞淋巴瘤（CTCL）亞型，蕈樣肉芽腫（MF）或Sézary綜合征（SS）。此外，該公司還有兩款在研CCR4抑制劑，分別是用于腫瘤治療的FLX475和用于特應(yīng)性皮炎治療的RPT193。而來自Therapeutic antibody database數(shù)據(jù)顯示，CCR4已有多款在研抗體藥物處于臨床前階段，但尚未公布具體的藥物臨床信息。近年來，CCR4在過敏性疾病、自身免疫性疾病，尤其在腫瘤研究中越來越受到重視，因其在Treg細(xì)胞行使Treg細(xì)胞腫瘤免疫抑制調(diào)控功能中扮演重要角色，這些研究的發(fā)現(xiàn)，提示CCR4或可成為腫瘤免疫靶向治療的新靶點(diǎn)。

為鼎力協(xié)助各藥企針對CCR4在過敏性疾病、自身免疫性疾病，尤其在腫瘤臨床中的研究，CUSABIO推出CCR4活性蛋白產(chǎn)品（Code: CSB-MP004843HU; Code: CSB-CF004843HU），助力您在CCR4機(jī)制方面的研究或其潛在臨床價值的探索。

● Recombinant Human C-C chemokine receptor type 4 (CCR4)-VLPs (Active)

High Specificity Validated by Western Blot (WB)

CSB-MP004843HU is detected by Mouse anti-6*His monoclonal antibody.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA

Immobilized Human CCR4 at 10 μg/ml can bind Anti-CCR4 recombinant antibody (CSB-RA004843MA01HU), the EC₅₀ is 362.3-630.8 ng/mL.

Correct Structure Validated by TEM

The presence of VLP-like structures was confirmed by TEM.

● Recombinant Human C-C chemokine receptor type 4 (CCR4) (Active)

High Purity Validated by SDS-PAGE

Purity was greater than 85% as determined by SDS-PAGE. (Tris-Glycine gel) Discontinuous SDS-PAGE (reduced) with 5% enrichment gel and 15% separation gel.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA

CCR4 at 5 μg/ml can bind Anti-CCR4 recombinant antibody (CSB-RA004843MA01HU), the EC₅₀ is 7.818-21.25 ng/mL.