cd31(PECAM-1)抗體制備流程方法和應(yīng)用
日期:2023-08-16 10:45:04
CD31(Cluster of Differentiation 31),也被稱為PECAM-1(Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule-1),是細(xì)胞表面蛋白,主要表達(dá)在內(nèi)皮細(xì)胞中。它在血管內(nèi)皮細(xì)胞間起到細(xì)胞粘附和信號傳導(dǎo)的重要作用。以下是CD31抗體的制備流程方法和應(yīng)用:
CD31抗體制備流程方法:
? 免疫原選擇:免疫原可以選擇純化的CD31蛋白或者含有CD31的細(xì)胞膜提取物。
免疫動物選擇:常用的免疫動物包括小鼠、兔子等。根據(jù)實驗需要選擇適合的免疫動物。
? 免疫原注射:將選擇的免疫原與佐劑混合后注射到免疫動物體內(nèi)。通常需要進行多次免疫來增強免疫效果。
? 獲得免疫細(xì)胞:在注射一定次數(shù)后,從免疫動物體內(nèi)獲取免疫細(xì)胞,如脾細(xì)胞或骨髓細(xì)胞。
? 融合細(xì)胞:將免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,形成雜交瘤細(xì)胞。
? 篩選和克?。和ㄟ^培養(yǎng)基中添加選擇抗生素等方法篩選并進行克隆,以獲得單克隆的CD31抗體產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞。
? 抗體純化:采用親和層析、凝膠過濾等技術(shù)對CD31抗體進行純化。
PECAM-1抗體的應(yīng)用:
? IHC免疫組化(Immunohistochemistry):CD31抗體可以用于檢測和定位血管內(nèi)皮細(xì)胞,在組織切片中顯示血管分布情況。
? ICC免疫細(xì)胞化學(xué)熒光染色(Immunocytochemistry):CD31抗體可以用于檢測和鑒定內(nèi)皮細(xì)胞及其衍生細(xì)胞。
? WB免疫印跡(Western Blotting):CD31抗體可以用于檢測CD31蛋白在細(xì)胞或組織中的表達(dá)水平。
? FC流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry):CD31抗體可以用于檢測血液中單個細(xì)胞表面的CD31蛋白,用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的鑒定和分類。
總的來說,CD31抗體的制備和應(yīng)用有助于研究血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和相關(guān)疾病,如血管發(fā)育、血管生成、心血管疾病等。