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陽離子填料純化抗體檢測方法?

日期:2023-07-12 13:51:59

    陽離子填料是一種常用于蛋白質純化過程中的材料,可以通過吸附和洗脫的方式來純化目標蛋白質。下面是一種使用陽離子填料純化抗體的方法:
 
    樣品制備:首先,將含有抗體的樣品加入適當的緩沖液中,以維持適宜的pH和離子強度。
 
    填料平衡:將陽離子填料溶懸液加入純化柱中,并使用緩沖液進行填充劑平衡,以確保填充劑與緩沖液之間的交互作用。
 
    樣品加載:將樣品溶液緩慢地加入填充劑平衡好的純化柱中,讓抗體與填料表面的正電荷相互作用,并發(fā)生吸附。
 
    洗脫:使用適當的洗脫緩沖液,可以通過改變pH、離子強度或洗脫劑濃度等條件,去除非特異性吸附的雜質蛋白質。洗脫后,目標抗體會被徹底洗脫出來。
 
    重生成:為了再次使用填充劑,可以使用一系列的重生成步驟來去除吸附在填充劑表面的殘留雜質和去離子緩沖液。
 
    最終純化:通過收集洗脫液中富集的抗體,可以得到高純度的抗體。
 
    該方法僅僅是一種常見的純化步驟之一,具體的純化方案還需要根據實驗需求和樣品特性進行優(yōu)化和調整。